1、如何獲得主板序列號(hào)?
???? 在操作界面點(diǎn)擊右上角設(shè)置標(biāo)簽,可以進(jìn)入主板信息界面。
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? 圖5. 主板信息界面
2、樣本加入電轉(zhuǎn)杯后需要馬上電轉(zhuǎn)嗎?電轉(zhuǎn)完成后需要立即取出樣品嗎?
????? 樣品加進(jìn)電擊管后,馬上進(jìn)行電轉(zhuǎn),完成后在處理下一個(gè)樣品,不要把一批樣品都加到電轉(zhuǎn)杯放置,然后再一起電轉(zhuǎn);等候時(shí)間過長(zhǎng),細(xì)胞沉降導(dǎo)致電轉(zhuǎn)杯內(nèi)細(xì)胞細(xì)胞密度不均勻而降低電轉(zhuǎn)效率。電擊完成后細(xì)胞可以馬上取出培養(yǎng),也可以等全部樣品處理完畢再取出培養(yǎng)。
3、不同的細(xì)胞電轉(zhuǎn)參數(shù)和體系不一致?
???? 不同類型的細(xì)胞,粒徑大小不同,電轉(zhuǎn)參數(shù)有所調(diào)整。
4、細(xì)胞密度越大越好?
???? 有些實(shí)驗(yàn)希望電轉(zhuǎn)效率高一些,細(xì)胞死亡多一些也可以接受,這時(shí)就可以嘗試適量提高電壓。同一種細(xì)胞,密度越大,需要的電壓低。
5、電轉(zhuǎn)后細(xì)胞存活率較低是什么原因引起的?
??? ①DNA質(zhì)量不合格,使用高濃度、高純度的DNA;
??? ②細(xì)胞狀態(tài)不佳,收集細(xì)胞時(shí),細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,密度約70-90%;離心轉(zhuǎn)速不要太高;另外吹打細(xì)胞時(shí)輕柔一些;