流式細(xì)胞周期
1、實驗原理
? ? ?細(xì)胞周期(Cell Cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時離開細(xì)胞周期,停止細(xì)胞分裂,執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)。
? ? ?流式細(xì)胞儀PI染色法檢測細(xì)胞周期的原理:碘化丙啶(Propidium,簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。PI和雙鏈DNA結(jié)合后可產(chǎn)生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA成正比。由于細(xì)胞周期各時相的DNA 含量不同,細(xì)胞內(nèi)的DNA被PI染色后,可以用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進行DNA含量測定,根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進行細(xì)胞周期的分析。
2、技術(shù)應(yīng)用
? ? ?檢測藥物、基因或蛋白等對細(xì)胞周期的影響。
3、實驗步驟
? ? ?1.細(xì)胞收集;2.細(xì)胞固定;3.細(xì)胞染色;4.流式細(xì)胞儀檢測;5.數(shù)據(jù)分析
4、結(jié)果展示
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客戶提供:細(xì)胞株(凍存株或培養(yǎng)細(xì)胞)及處理用的藥物,細(xì)胞培養(yǎng)基信息,細(xì)胞特殊處理方式
HYY提供:原始圖片、流式原始數(shù)據(jù),完整實驗報告