siRNA瞬轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)染
1.實驗原理:
? ? ? ?RNA 干擾(RNA interfering,RNAi)現(xiàn)象是由與靶基因序列同源的雙鏈 RNA(double-stranded RNA,dsRNA)引發(fā)的廣泛存在于生物體內(nèi)的序列特異性基因轉(zhuǎn)錄后的沉默過程。細(xì)胞中的核糖核酸 酶 III 家族成員之一的,dsRNA 特異性的核酸酶 Dicer 將 dsRNA 裂解成由 21-25 個核苷酸組成的小干 擾 RNA(small interfering RNA,siRNA),隨后 siRNA 作為介導(dǎo)子引起特異性地降解相同序列的 mRNA,從而阻斷相應(yīng)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后基因沉默機制。
2.技術(shù)應(yīng)用
? ? ? ?使用瞬時轉(zhuǎn)染/感染可觀察外源基因表達(dá)后較短時間內(nèi)就能檢測的細(xì)胞功能,如CCK8,Transwell等,即在轉(zhuǎn)染后24至96小時內(nèi)收獲細(xì)胞進行相關(guān)檢測;
3.實驗流程
4.結(jié)果展示
客戶提供:細(xì)胞株(凍存管/培養(yǎng)細(xì)胞),目的蛋白抗體,目的基因信息、細(xì)胞培養(yǎng)信息
HYY提供:熒光圖片,WB鑒定報告,QPCR鑒定報告