1、實驗原理
? ? ?細胞遷移是指細胞在接收到內(nèi)源或外源遷移信號后而產(chǎn)生的移動。細胞遷移是通過胞體形變進行的緩慢的定向移動,涉及細胞覓食、傷口痊愈、胚胎發(fā)生、免疫反應、感染和癌癥轉(zhuǎn)移等生理現(xiàn)象。因此通過對細胞遷移的研究,對阻止癌癥轉(zhuǎn)移、異體植皮等醫(yī)學應用方面具有一定意義。細胞侵襲實驗則是研究腫瘤細胞對基質(zhì)膜消化后的遷移運動,腫瘤細胞須經(jīng)血管基底膜穿入深面間質(zhì)后才能侵襲組織和轉(zhuǎn)移至遠處。
? ? ?腫瘤細胞侵襲遷移能力的改變通常采用Transwell小室進行檢測。Transwell小室是一種膜濾器,也認為是一種有通透性的支架(Permeable Supports)。這層膜帶有微孔,孔徑大小0.1-12.0μm,根據(jù)不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜。將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液,下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可用影像到上室內(nèi)的細胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。
2、技術應用
? ? ?應用包括細胞遷移、趨化(趨化因子對細胞的定向誘導),侵襲(癌細胞侵襲上指腫瘤細胞向局部侵犯或遠處轉(zhuǎn)移),共培養(yǎng)(同一培養(yǎng)體系里,兩種細胞非接觸性培養(yǎng))。
3、實驗步驟
? ? ?1.細胞培養(yǎng);2.基質(zhì)膠覆蓋小室;3.細胞計數(shù)及接種小室;4.結(jié)晶紫染色;5封片和拍照;6. 結(jié)果分析
4、結(jié)果展示
? ? ?? ??
客戶提供:細胞株(凍存株或培養(yǎng)細胞)及處理用的藥物,細胞培養(yǎng)基信息,細胞特殊處理方式
HYY提供:原始圖片、原始數(shù)據(jù),完整實驗報告