一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1.儀器準(zhǔn)備：電轉(zhuǎn)儀器、離心機(jī)、恒溫?fù)u床、恒溫培養(yǎng)箱。
2.耗材試劑準(zhǔn)備：電轉(zhuǎn)杯、電轉(zhuǎn)液、槍頭、帶抗性LB平板、SOC培養(yǎng)基、1.5mL EP管、錐形瓶、待電轉(zhuǎn)質(zhì)粒。

二、實(shí)驗(yàn)流程
1.大腸桿菌（DH5a）接菌（1:100）到5mL 無(wú)抗LB培養(yǎng)基/SOC培養(yǎng)基，搖菌6-8h，直至對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)。（OD600：0.7-1.0）
2.用6600 rpm/min x 5min收集活菌沉淀。
3.CellEasy電轉(zhuǎn)液重懸，洗兩遍。6600 rpm/min x 2min。用1mL電轉(zhuǎn)液重懸細(xì)菌，可分裝10管，0.1mL/管，備用。
4.1ug質(zhì)粒和0.1mL菌液混勻。電轉(zhuǎn)質(zhì)粒濃度最好10ug/mL以上。
5.移取85ul混合液與1mm電轉(zhuǎn)管中，按細(xì)菌電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行設(shè)置（細(xì)菌電轉(zhuǎn)：800-1200V，5ms）
6.電轉(zhuǎn)完畢后，取出電轉(zhuǎn)杯，加入2mL 預(yù)冷SOC培養(yǎng)，緩慢重懸，移至
? 新的1.5mL EP管中。
7.37度恒溫?fù)u床，200rpm/min，培養(yǎng)30-45min。
8.取適量菌液涂板。（可選：瞬離后，移取部分培養(yǎng)基，重懸100-200uL體積重懸菌液，涂布于帶有質(zhì)粒相應(yīng)抗性的LB平板中）
9.37度恒溫培養(yǎng)箱靜止培養(yǎng)過(guò)夜。（12-16小時(shí)）

細(xì)菌電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn).pdf