老年黃斑變性（age-related macular degeneration，AMD），是50歲以上人群中可導(dǎo)致視力受損的一種常見疾病，其發(fā)病率隨著年齡增長而增大。AMD一般發(fā)展得比較緩慢，在前期有很長一段時(shí)間并不會(huì)影響患者的視力，患者隨著年齡增常才會(huì)逐漸出現(xiàn)視力受損的癥狀（不過也有少部分患者病情發(fā)展得比較迅速）。AMD一般不會(huì)引起完全的眼盲，但會(huì)模糊人的中心視野，妨礙一些重要日?；顒?dòng)，比如要看清別人的臉，開車，煮飯等活動(dòng)將變得異常艱難。研究發(fā)現(xiàn)戒煙，適量運(yùn)動(dòng)，保持正常的血壓和膽固醇水平，健康飲食，多補(bǔ)充綠葉蔬菜和魚類等健康的生活作息可以降低患上AMD的風(fēng)險(xiǎn)。?

地圖狀萎縮（Geographic atrophy，GA）是黃斑的一種慢性漸進(jìn)性退變，主要表現(xiàn)為局部視網(wǎng)膜外圍組織、視網(wǎng)膜色素上皮和脈絡(luò)膜毛細(xì)血管明顯萎縮。GA是晚期AMD的一部分，可以導(dǎo)致中央暗點(diǎn)和永久性喪失視力。

（圖片來源：beckenham optometrist官網(wǎng)）

Drusen是AMD患者的視網(wǎng)膜下色素上皮（retinal pigmented epithelium，RPE）細(xì)胞外的沉積物，在眼底相中表現(xiàn)為黃斑區(qū)的黃白色類圓形小病灶。Drusen會(huì)隨著病情的加重而增多或增大，發(fā)展到一定程度時(shí)患者可能會(huì)有視野中心出現(xiàn)固定“黑影”的感覺。

（圖片來源：cellcureneurosciences官網(wǎng)）

NLRP3炎性小體是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可以識(shí)別病原體或損傷相關(guān)因子（PAMPs / DAMPs）然后引發(fā)炎癥反應(yīng)的蛋白多聚體復(fù)合物。NLRP3炎性小體的激活需要ASC蛋白的參與，被激活的炎性小體會(huì)促使細(xì)胞生成細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白caspase-1，還有炎癥因子IL-1β和IL-18。已有研究表明NLRP3炎性小體的激活會(huì)促使AMD疾病中的RPE退化。

β-淀粉樣蛋白低聚物（amyloid-β oligomers ，AβOs）是Drusen的主要成分，近期發(fā)表在Signal Transduction and Targeted Therapy期刊上的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)：AβOs可以通過影響嘌呤能受體P2RX7和NLRP3炎性小體的表達(dá)水平來引發(fā)RPE退化；另外，炎性小體抑制劑——核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NRTIs）和kamuvudines（NRTIs的無毒衍生物）能夠抑制AβOs引起的RPE退化。

1、AβOs誘導(dǎo)RPE中NLRP3炎性小體復(fù)合物的形成

研究人員通過對(duì)Nlrp3-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行視網(wǎng)膜下注射AβOs，觀察到AβOs可以激活NLRP3基因的表達(dá)（圖1a）。

（圖1a：共聚焦顯微鏡下的小鼠視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）和脈絡(luò)膜層，免疫熒光染緊密連接蛋白ZO-1?！癙BS”為對(duì)照組，“AβOs”為AβOs注射組，綠色熒光越強(qiáng)代表NLRP3基因表達(dá)越強(qiáng)。）

研究人員通過構(gòu)建ASC-CitrineFlox/Best1-Cre+小鼠（在RPE中特異性表達(dá)ASC蛋白），觀察到AβOs使ASC蛋白表達(dá)水平上升（圖1b,c）。

（圖1b,c：綠色熒光越強(qiáng)代表ASC蛋白水平越高）

2、NLRP3炎性小體促使AβOs引起的RPE退化

研究人員通過敲除小鼠炎性小體的幾種組成蛋白（NLRP3, gasdermin D, caspase-1, ASC）的相關(guān)基因（Nlrp3, Gsdmd, Casp1, Pycard）,發(fā)現(xiàn)AβOs不能引起基因敲除小鼠的RPE退化（圖2a-e），證明NLRP3炎性小體對(duì)與AβOs引起的RPE退化是必須的。

（圖2a-e：上行為眼底影像，白色箭頭指的是退化的組織部位；下行為視網(wǎng)膜色素上皮和脈絡(luò)膜層）

3、人P2RX7蛋白表達(dá)在AβOs引起的RPE退化中起關(guān)鍵作用

嘌呤能受體P2RX7是NLRP3炎性小體的一個(gè)上游蛋白，研究人員觀察到AβOs不能在P2RX7敲除的小鼠中引起RPE退化（圖3a）。因?yàn)槿撕托∈蟮腜2RX7蛋白在免疫活性上存在顯著的種間差異，并且有報(bào)道表示P2RX7敲除的小鼠中仍存在部分有功能的P2RX7剪接異構(gòu)體，所以研究人員構(gòu)建了P2rx7hP2RX7Flox/Best1-Cre+小鼠（不表達(dá)P2RX7）和P2rx7hP2RX7Flox小鼠（表達(dá)人P2RX7），發(fā)現(xiàn)只有表達(dá)人P2RX7的小鼠才會(huì)發(fā)生AβOs引起的RPE退化（圖3b-d）。

（圖3a-d：b圖中黑色箭頭指的是視神經(jīng)，表明在P2rx7hP2RX7Flox/Best1-Cre+小鼠中P2RK7在RPE之外的組織里仍有表達(dá)）

4、NRTIs（核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑） 和 Kamuvudines（NRTIs的無毒衍生物）抑制AβOs引起的RPE退化

研究人員對(duì)小鼠眼球玻璃體分別注射兩種NRTIs藥物（拉米夫定、齊多夫定）和兩種Kamuvudines藥物（2-乙基齊多夫定、3-甲基拉米夫定），觀察到藥物對(duì)AβOs引起的RPE退化的抑制作用有劑量依賴性（圖3a）。光學(xué)相干斷層掃描（OCT）顯示視網(wǎng)膜下注射AβOs之后視網(wǎng)膜色素上皮和感光細(xì)胞外段的損壞，以及藥物對(duì)這種損壞的抑制（圖3b）。

（圖4a, b）

參考文獻(xiàn)：Narendran, S., Pereira, F., Yerramothu, P. et al. Nucleoside reverse transcriptase inhibitors and Kamuvudines inhibit amyloid-β induced retinal pigmented epithelium degeneration. Sig Transduct Target Ther 6, 149 (2021). https://doi.org/10.1038/s41392-021-00537-z